Högpresterande vätskekromatografi ( HPLC ) är ett värdefullt verktyg för moderna organiska kemister eftersom det gör dem inte bara för att separera en blandning i sina beståndsdelar , men också för att kvantifiera hur mycket av varje är närvarande . Även HPLC -enheter är sofistikerade instrument , kan deras prestanda försämras gradvis med tiden . För att säkerställa att de fungerar korrekt och leverera tillförlitliga resultat , är det viktigt att kontrollera sina resultat regelbundet . Flöde & Pressure
Pumpen måste kunna upprätthålla korrekta flöden . Testning av flödeshastigheten är ganska enkelt och endast innebär mätning av den tid som krävs för att samla in en godtyckligt vald mängd lösningsmedel från kolonnen vid olika inställningar flödeshastighet. Pumptrycket kan testas genom att ansluta pumputloppet med en död – mutter och ansluta en brännare för att mäta pumphuvud tryck. Trycket bör öka snabbt till ca 3000 pounds per kvadrattum ( PSI) och ökar sedan mer gradvis till ett högre tryck , vid vilket tillfälle pumpen stängs av automatiskt . Om trycket fluktuerar på 3,000 PSI eller minskar snabbt efter att pumpen stängs av , innebär det oftast ett fel , som en läcka i systemet .
Gradient
Pumpen måste också korrekt kunna variera kompositionen för lösningsmedlet eller mobil fas , och därigenom eluera eller spolning från kolonnen alltmer opolära föreningar som procentandelen av de mindre polära lösningsmedel ökar. Gradient noggrannhet testas med hjälp av två kanaler samtidigt , en av dem som ger rent lösningsmedel och den andra ett lösningsmedel med en upplöst tracer kemikalie , som koffein . Eftersom koncentrationen av den andra lösningen ökar , kan du mäta ultraviolett ( UV ) absorbans kolumnutgångenoch använda dessa data för att kontrollera lutning noggrannhet .
Injector Modul
injektor modulens precision kan testas genom att utföra sex upprepade injektioner med ett enda prov ; signifikanta skillnader i resultaten föreslår att du har ett problem . Vissa experiment involverar injektion variabla volymer , så det är också viktigt att testa injektorn förmåga att dra lämplig mängd prov . Genom att utföra injektioner över 0 till 100 mikroliter område , kan en kemist inhämta och rita uppgifter och bestämma korrelationen mellan resultaten och provkoncentrationen. En svag korrelation tyder på något fel .
Detector Modul
Detektormodulregister absorbansen för lösta ämnen och lösningsmedel eluering eller strömmande från botten av kolonnen , så att dess riktighet är särskilt avgörande för att säkerställa goda resultat . Många HPLC- instrument inkluderar inbyggd våglängdsverifieringsförmåga att säkerställa våglängden detektorn använder är samma som den du har valt . Ett annat test innebär att man använder en serie prover som innehåller en ökande koncentration av en förening som koffein . Kemisten kan sedan plotta resultat jämfört lösning koncentrationen testet och bestämma styrkan i sambandet . En svag korrelation tyder på något fel . Addera